細胞處理：

1） 凍存細胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

MHCC97-L (人低轉(zhuǎn)移肝癌細胞)

商品屬性

商品介紹

年齡（性別） 39歲

組織來源 肝；肝癌

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA 試劑盒

Human urinary protein (UP) ELISA Kit 人尿蛋白(UP)檢測試劑盒

HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineapigleukoieneD4,LT-D4檢測試劑盒豚鼠白三烯D4(LTD4)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞壁可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseCA724ELISAKit小鼠腫瘤標志物(CA724)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽) Protein

GABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白

GABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍蛋白

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽) Protein

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

MHCC97-L (人低轉(zhuǎn)移肝癌細胞)豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytokeratin 20 (CK-20) ELISA Kit 人細胞角蛋白20(CK-20)檢測試劑盒

Humanai-scleroderma70aibody,SCL70/topoⅠELISAKit 人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclin-D2檢測試劑盒人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA規(guī)格：96T/48T

組織FLT3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人周期素依賴性激酶5(CDK-5)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人周期素依賴性激酶4(CDK-4)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人周期素依賴性激酶2(CDK-2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人重組激活基因2(RAG-2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝